产品描述
【保存条件】
4ºC保存，有效期12个月
【概述】
本产品是以 Tris-EDTA 为基础的高效抗原修复储备液（100×），专为石蜡切片、冰冻切片在免疫组化（IHC）或免疫荧光（IF）实验前的表位暴露而设计。
双重机制：结合了高pH（碱性环境）的热效应与EDTA的螯合作用。它能有效打破醛类固定引起的蛋白交联，同时螯合屏蔽抗原表位的金属离子，协同增强修复效果。
应用范围：广泛适用于多聚甲醛、甲醛或其他醛类固定的组织样本。
性能特点：相比于柠檬酸钠（pH 6.0），Tris-EDTA (pH 9.0) 通常能提供更强的染色强度，是解决弱信号抗体、疑难抗原修复的首选方案。
【实验前准备】
1. 工作液配制 (1×) ：使用去离子水或蒸馏水将100×储备液稀释100倍。
示例：取10 mL 100×母液加入990 mL去离子水中，混合均匀即得1×工作液。
2. 预热：建议在使用前将1×工作液预热至95-100°C，以确保修复的一致性。
【操作方法】
1. 样本预处理
石蜡切片：二甲苯3次，每次3-5min→无水乙醇2次，每次3-5min→ 95％乙醇1次，3-5min→ 90%乙醇1次，3-5min→ 75％乙醇1次，3-5min→蒸馏水洗2次，每次3-5min，确保切片彻底水化。
冰冻切片：用免疫染色洗涤液（如PBS）浸洗5 min。
2. 热修复步骤（核心步骤）
① 将预处理后的切片浸入已预热至95–100°C的1×修复液中。
② 加热维持：持续加热10–20 min（标准推荐时长为15min）。
水浴锅：温度最均匀，适合对温度敏感的组织。
微波炉：加热速度快，但必须防止暴沸导致切片干涸或脱落。建议使用中低功率。
压力锅：修复强度最高，适合极难暴露的抗原，但需严格控制时间。
3. 冷却与后处理（防脱片关键）
① 自然冷却：修复结束后，将容器取出，在室温下自然冷却20–30 min至室温。
警告：严禁直接放入冷水中骤冷，否则极易导致组织脱片。
② 洗涤：用免疫染色洗涤液（如PBS）洗涤2–3次，每次3–5 min。
③ 后续实验：直接进入封闭或内源性酶阻断步骤。
【注意事项】
1. 最佳参数摸索：抗原修复受固定时长、组织厚度、抗体特性等多种因素影响。若信号过弱，可适当延长修复时间（至20 min）；若出现背景过高，可尝试缩短时间。
2. 结晶说明：高浓度储备液在低温下可能析出白色结晶，使用前请置于37ºC水浴溶解并摇匀，不影响使用效果。
3. EDTA的特殊性：某些金属依赖型酶学实验或特定抗体可能受EDTA影响，请根据抗体说明书选择。
4. 防止脱片：pH 9.0环境下，组织较易从玻片脱落。建议使用高粘附性防脱玻片。
5. 冷却严禁骤冷：修复后的组织处于物理性质脆弱期，突然的温差会导致组织结构受损或掉片。
6. 安全防护：操作时请按实验室规范佩戴实验服与一次性手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ES-8342、抗原修复、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
4ºC保存
常见问题 (FAQ)
可以用于哪些下游应用？
应用：① IHC 抗原修复（最主要）；② IF 切片抗原修复；③ 多重 IHC（mIHC）；④ 数字病理 AI 训练样品；⑤ 部分 ISH（原位杂交）前处理。
常见失败原因？
① 修复不彻底 — 温度 / 时间不足、pH 选错（依抗体）；② 切片脱片 — 修复时间过长、温度过高（>120℃）、玻片处理不当；③ 背景高 — 修复液污染 / pH 漂移；④ IHC 信号弱 — 修复后未充分洗涤；切片在冷却前移动。
本品如何稀释（如为 100×）？
如果是 1× 即用工作液 — 直接使用。如果是浓缩储液（100×）— 用蒸馏水按 1:100 稀释为 1× 工作液后使用。
低 pH（如 pH 6.0）vs. 高 pH（如 pH 9.0）选择？
低 pH 柠檬酸缓冲液（pH 6.0）— 温和，适合大多数胞质抗原，组织形态保留好；高 pH Tris-EDTA（pH 9.0）— 强力，适合核蛋白、磷酸化蛋白等难修复抗原，但可能略影响形态。新抗体推荐两种 pH 都试。
抗原修复时间过长 / 过短？
时间过长 — 切片脱片，组织形态破坏；时间过短 — 抗原暴露不完全，IHC 信号弱。新抗体首次实验建议做时间梯度（10、20、30 分钟）确定最佳条件。
加热方式选择？
微波 — 快速便捷（10–15 分钟），但温度控制差，多张切片可能不均；高压锅 — 温度均匀（121℃ 10 分钟），适合批量切片；水浴锅 — 温度可控（95℃ 30 分钟）但耗时较长；电饭锅 — 简易替代（95–100℃ 30 分钟）。
本品（Tris-EDTA pH 9.0）的特点？
Tris-EDTA pH 9.0 适用于：难修复抗原（如核内蛋白、磷酸化蛋白），强碱性条件解开严重交联，更广泛适用
标准操作流程？
典型流程：① 切片脱蜡水化；② 加入抗原修复液浸没切片；③ 微波 / 高压锅加热到 95–100℃ 持续 10–30 分钟；④ 自然冷却到室温（关键 — 让抗原构象稳定）；⑤ PBS 洗涤；⑥ 后续 IHC 步骤。
抗原修复液的工作原理？
抗原修复（Antigen Retrieval）用于福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）切片的 IHC 抗原暴露。机制 — 福尔马林固定时与赖氨酸 ε-氨基与精氨酸胍基形成共价亚甲基桥（methylene bridge），导致蛋白-蛋白与蛋白-核酸交联，masked 抗原；高温 + 缓冲液逆转交联，恢复抗原的 IHC 可识别构象。本品为 Tris-EDTA pH 9.0 抗原修复液。
