ES-8794 1-Step 免封闭WB抗体稀释液

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ES-8794 1-Step 免封闭WB抗体稀释液
货号 (Catalog Number): ES-8794

产品描述

【保存条件】

4℃保存,有效期12个月


特点

极速流程:集成封闭与稀释双重功能,无需额外封闭处理,显著缩短实验耗时。

一液多用:既可作为高效WB封闭液,也可作为一抗、二抗的通用稀释液。 

超低背景:特有有机化合物成分,有效减少非特异性结合,提供极高信噪比。

增效稳定:显著提升抗体生物活性与稳定性,增强免疫反应强度,支持抗体多次复用。

广谱兼容:完美兼容化学发光(ECL)及荧光检测系统,适用于磷酸化蛋白等各类抗原检测。


概述

本产品专门用于Western Blot实验中膜的封闭和抗体的稀释。本品含有特殊的化合物组分,可迅速阻断膜上非特异性位点,从而显著缩短实验反应时间,提高效率。本产品在有效降低背景的同时,能有效保护抗体的生物活性。使用本产品稀释的一抗/二抗工作液,通常可以在4°C存放3个月以上。本品含有进口防腐剂,完全兼容 HRP 及荧光标记,适用于常规一抗(含磷酸化一抗)、二抗以及各类标记抗体的稀释。


【使用建议(仅供参考)】

1. 样品前处理:按照常规方法进行蛋白电泳与转膜。

2. 封闭策略
免封闭流程(推荐):转膜结束后,用洗涤液(TBST或PBST)简述润洗5秒,弃去液体后,直接加入用本品稀释好的一抗工作液。 
独立封闭流程:若后续使用其他品牌稀释液,建议进行预封闭。将膜浸没于本品中,水平摇床室温孵育10分钟左右即可。
注:若需暂时中断实验,可将此步骤移至4°C静置进行(30分钟至24小时)。 

3. 抗体孵育

① 一抗孵育:使用本品将一抗稀释至工作浓度。加入足量稀释液(完全浸没膜),于水平摇床室温孵育30-60分钟。 注:高亲和力抗体可适当缩短时间,低亲和力抗体可适当延长时间;若使用免封闭流程,请务必先将抗体与本品充分混匀后再加入膜上。

② 洗涤:使用TBST或PBST快速润洗2次(每次5秒),随后在摇床上洗涤3-5次(每次3-5分钟)。 

③ 二抗孵育:使用本品稀释二抗。加入足量稀释液,水平摇床室温或37°C孵育30-60分钟。注:若使用HRP直接标记的一抗,请跳过此步。 

④ 洗涤:使用TBST或PBST快速润洗2次(每次5秒),随后在摇床上洗涤3-5次(每次3-5分钟),彻底洗去残留二抗。

4. 检测成像洗涤结束后,加入ECL底物进行化学发光检测或荧光成像。


【注意事项】

1. 抗体复用:为延缓抗体衰减,建议尽量在4°C进行孵育反应,多余的工作液请及时放回 4°C 存放。

2. 浓度优化:首次使用本品建议重新摸索抗体比例。建议固定二抗浓度(约0.05-0.1μg/mL),通过调整一抗浓度获得最佳显影效果。

3. 稳定性:稀释后的抗体通常在4°C可稳定存放3-6个月,但因抗体种类不同稳定性有所差异,具体请根据实验背景自行判断。

4. 安全防护:本品仅供科研使用。操作时请佩戴实验服与一次性手套。

产品规格

货期
现货
规格
100ml、500ml

应用领域

本产品适用于ES-8794、转膜及封闭、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。

存储条件

4℃保存

品牌: ECOTOP SCIENTIFIC

常见问题 (FAQ)

试剂如何保存?

4℃ 保存,有效期 12 个月。

可用于哪些应用场景?

Western Blot 实验中膜的封闭和抗体的稀释。扩展应用:① 应急快速 WB(30 min 完成封闭 + 一抗);② 临床实验室常规 WB(流程简化);③ 磷酸化蛋白 WB(长期保存抗体不影响磷酸化检测);④ 抗体节省(4℃ 保存 3–6 个月,多次复用)。本产品在有效降低背景的同时,能有效保护抗体的生物活性。

洗涤步骤的快洗 + 慢洗组合?

洗涤:使用 TBST 或 PBST 快速润洗 2 次(每次 5 秒),随后在摇床上洗涤 3–5 次(每次 3–5 分钟)。——快速润洗去掉大部分游离抗体,摇床慢洗去除非特异结合的痕量抗体,两者结合提供最低背景。

抗体复用与浓度优化?

① 抗体复用:为延缓抗体衰减,建议尽量在 4℃ 进行孵育反应,多余的工作液请及时放回 4℃ 存放;② 浓度优化:首次使用本品建议重新摸索抗体比例(与传统 BSA 稀释液相比可能有差异)。建议固定二抗浓度(约 0.05–0.1 µg/mL),通过调整一抗浓度获得最佳显影效果;③ 稳定性:稀释后的抗体通常在 4℃ 可稳定存放 3–6 个月,但因抗体种类不同稳定性有所差异。

兼容磷酸化抗体?

完美兼容化学发光(ECL)及荧光检测系统,适用于磷酸化蛋白等各类抗原检测。——本品含进口防腐剂,完全兼容 HRP 及荧光标记,适用于常规一抗(含磷酸化一抗)、二抗以及各类标记抗体的稀释。使用本产品稀释的一抗/二抗工作液,通常可以在 4℃ 存放 3 个月以上。

完整 WB 流程参数?

① 样品前处理:常规蛋白电泳与转膜;② 免封闭流程:洗涤液简洗 5 s → 直接加用本品稀释好的一抗工作液;③ 一抗孵育:用本品稀释至工作浓度,足量浸没膜,水平摇床室温孵育 30–60 min(高亲和力抗体可缩短,低亲和力可延长);④ 洗涤:TBST/PBST 快速润洗 2 次(每次 5 s)→ 摇床上洗涤 3–5 次(每次 3–5 min);⑤ 二抗孵育:用本品稀释二抗,水平摇床室温或 37℃ 孵育 30–60 min(HRP 直接标记的一抗跳过此步);⑥ 洗涤:同上;⑦ 检测成像:ECL 化学发光或荧光成像。

独立封闭流程?

独立封闭流程:若后续使用其他品牌稀释液,建议进行预封闭。将膜浸没于本品中,水平摇床室温孵育 10 分钟左右即可。注:若需暂时中断实验,可将此步骤移至 4℃ 静置进行(30 分钟至 24 小时)。——也可用本品做单独封闭,再用其他稀释液稀释抗体。

免封闭流程的核心?

免封闭流程(推荐):转膜结束后,用洗涤液(TBST 或 PBST)简述润洗 5 秒,弃去液体后,直接加入用本品稀释好的一抗工作液。——这是本品最大卖点:省去单独的封闭步骤,膜转完后简洗 5 秒就直接进入抗体孵育,节省 30–60 min 封闭时间。

与 ES-8792 / ES-8710 / ES-8715 的区别?

ES-8794(本品)一站式:① 集成封闭 + 稀释双重功能——可省略封闭步骤;② 抗体稀释后 4℃ 可存放 3 个月以上;③ 仅用于 WB。ES-8792 增强型抗体稀释液:仅稀释抗体(不可封闭);适用 WB/IF/IHC/ELISA 多种应用。ES-8710/8715 无蛋白封闭液:仅封闭(不可稀释抗体)。选择:① WB 极致省时 → ES-8794(封闭+稀释一站式);② 多应用场景 → ES-8792 + 单独封闭液;③ 成本敏感 → 传统 BSA + 封闭液分开。

本产品的核心特点?

特点:① 极速流程:集成封闭与稀释双重功能,无需额外封闭处理,显著缩短实验耗时;② 一液多用:既可作为高效 WB 封闭液,也可作为一抗、二抗的通用稀释液;③ 超低背景:特有有机化合物成分,有效减少非特异性结合,提供极高信噪比;④ 增效稳定:显著提升抗体生物活性与稳定性,支持抗体多次复用;⑤ 广谱兼容:完美兼容 化学发光(ECL)及荧光检测系统,适用于磷酸化蛋白等各类抗原检测。

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【保存条件】

4℃保存,有效期12个月


特点

极速流程:集成封闭与稀释双重功能,无需额外封闭处理,显著缩短实验耗时。

一液多用:既可作为高效WB封闭液,也可作为一抗、二抗的通用稀释液。 

超低背景:特有有机化合物成分,有效减少非特异性结合,提供极高信噪比。

增效稳定:显著提升抗体生物活性与稳定性,增强免疫反应强度,支持抗体多次复用。

广谱兼容:完美兼容化学发光(ECL)及荧光检测系统,适用于磷酸化蛋白等各类抗原检测。


概述

本产品专门用于Western Blot实验中膜的封闭和抗体的稀释。本品含有特殊的化合物组分,可迅速阻断膜上非特异性位点,从而显著缩短实验反应时间,提高效率。本产品在有效降低背景的同时,能有效保护抗体的生物活性。使用本产品稀释的一抗/二抗工作液,通常可以在4°C存放3个月以上。本品含有进口防腐剂,完全兼容 HRP 及荧光标记,适用于常规一抗(含磷酸化一抗)、二抗以及各类标记抗体的稀释。


【使用建议(仅供参考)】

1. 样品前处理:按照常规方法进行蛋白电泳与转膜。

2. 封闭策略
免封闭流程(推荐):转膜结束后,用洗涤液(TBST或PBST)简述润洗5秒,弃去液体后,直接加入用本品稀释好的一抗工作液。 
独立封闭流程:若后续使用其他品牌稀释液,建议进行预封闭。将膜浸没于本品中,水平摇床室温孵育10分钟左右即可。
注:若需暂时中断实验,可将此步骤移至4°C静置进行(30分钟至24小时)。 

3. 抗体孵育

① 一抗孵育:使用本品将一抗稀释至工作浓度。加入足量稀释液(完全浸没膜),于水平摇床室温孵育30-60分钟。 注:高亲和力抗体可适当缩短时间,低亲和力抗体可适当延长时间;若使用免封闭流程,请务必先将抗体与本品充分混匀后再加入膜上。

② 洗涤:使用TBST或PBST快速润洗2次(每次5秒),随后在摇床上洗涤3-5次(每次3-5分钟)。 

③ 二抗孵育:使用本品稀释二抗。加入足量稀释液,水平摇床室温或37°C孵育30-60分钟。注:若使用HRP直接标记的一抗,请跳过此步。 

④ 洗涤:使用TBST或PBST快速润洗2次(每次5秒),随后在摇床上洗涤3-5次(每次3-5分钟),彻底洗去残留二抗。

4. 检测成像洗涤结束后,加入ECL底物进行化学发光检测或荧光成像。


【注意事项】

1. 抗体复用:为延缓抗体衰减,建议尽量在4°C进行孵育反应,多余的工作液请及时放回 4°C 存放。

2. 浓度优化:首次使用本品建议重新摸索抗体比例。建议固定二抗浓度(约0.05-0.1μg/mL),通过调整一抗浓度获得最佳显影效果。

3. 稳定性:稀释后的抗体通常在4°C可稳定存放3-6个月,但因抗体种类不同稳定性有所差异,具体请根据实验背景自行判断。

4. 安全防护:本品仅供科研使用。操作时请佩戴实验服与一次性手套。

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