ES-8794 1-Step 免封闭WB抗体稀释液

【保存条件】

4℃保存，有效期12个月

【特点】

极速流程：集成封闭与稀释双重功能，无需额外封闭处理，显著缩短实验耗时。

一液多用：既可作为高效WB封闭液，也可作为一抗、二抗的通用稀释液。 

超低背景：特有有机化合物成分，有效减少非特异性结合，提供极高信噪比。

增效稳定：显著提升抗体生物活性与稳定性，增强免疫反应强度，支持抗体多次复用。

广谱兼容：完美兼容化学发光（ECL）及荧光检测系统，适用于磷酸化蛋白等各类抗原检测。

【概述】

本产品专门用于Western Blot实验中膜的封闭和抗体的稀释。本品含有特殊的化合物组分，可迅速阻断膜上非特异性位点，从而显著缩短实验反应时间，提高效率。本产品在有效降低背景的同时，能有效保护抗体的生物活性。使用本产品稀释的一抗/二抗工作液，通常可以在4°C存放3个月以上。本品含有进口防腐剂，完全兼容 HRP 及荧光标记，适用于常规一抗（含磷酸化一抗）、二抗以及各类标记抗体的稀释。

【使用建议（仅供参考）】

1. 样品前处理：按照常规方法进行蛋白电泳与转膜。

2. 封闭策略
免封闭流程（推荐）：转膜结束后，用洗涤液（TBST或PBST）简述润洗5秒，弃去液体后，直接加入用本品稀释好的一抗工作液。 
独立封闭流程：若后续使用其他品牌稀释液，建议进行预封闭。将膜浸没于本品中，水平摇床室温孵育10分钟左右即可。
注：若需暂时中断实验，可将此步骤移至4°C静置进行（30分钟至24小时）。 

3. 抗体孵育

①　一抗孵育：使用本品将一抗稀释至工作浓度。加入足量稀释液（完全浸没膜），于水平摇床室温孵育30-60分钟。 注：高亲和力抗体可适当缩短时间，低亲和力抗体可适当延长时间；若使用免封闭流程，请务必先将抗体与本品充分混匀后再加入膜上。

②　洗涤：使用TBST或PBST快速润洗2次（每次5秒），随后在摇床上洗涤3-5次（每次3-5分钟）。 

③　二抗孵育：使用本品稀释二抗。加入足量稀释液，水平摇床室温或37°C孵育30-60分钟。注：若使用HRP直接标记的一抗，请跳过此步。 

④　洗涤：使用TBST或PBST快速润洗2次（每次5秒），随后在摇床上洗涤3-5次（每次3-5分钟），彻底洗去残留二抗。

4. 检测成像：洗涤结束后，加入ECL底物进行化学发光检测或荧光成像。

【注意事项】

1. 抗体复用：为延缓抗体衰减，建议尽量在4°C进行孵育反应，多余的工作液请及时放回 4°C 存放。

2. 浓度优化：首次使用本品建议重新摸索抗体比例。建议固定二抗浓度（约0.05-0.1μg/mL），通过调整一抗浓度获得最佳显影效果。

3. 稳定性：稀释后的抗体通常在4°C可稳定存放3-6个月，但因抗体种类不同稳定性有所差异，具体请根据实验背景自行判断。

4. 安全防护：本品仅供科研使用。操作时请佩戴实验服与一次性手套。