产品描述
【保存条件】
-20℃避光保存，有效期1年；4℃避光储存，有效期3个月。
【概述】
固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固，终止内源性或外源性酶反应，防止组织自溶或异溶，以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活或弥散。固定液种类很多，常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。
多聚甲醛固定液是一种广泛用于免疫组化(IHC)、免疫荧光( IF)、免疫细胞化学(IC)、流式分析(FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。
本产品为3% 多聚甲醛PBS溶液(3% PFA)，主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成，该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定，是免疫组织化学和培养细胞的固定液之一，它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。其固定效果好、应用广，适用于各种常见细胞或组织的固定，对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果，但主要作用于蛋白质，无法固定尿酸和糖类等。
若需使用低浓度多聚甲醛，可使用PBS按比例稀释。
【使用建议】
对于细胞样品，去除培养液后，按照每六孔板一个孔加入1毫升固定液的比例，加入3%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品，加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定10-20分钟即可，但固定较长时间，例如1-2小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。
对于组织切片，加入3% 多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准，或使用染色架进行固定。通常室温固定10-20分钟即可完成固定，但切片较厚时可以固定较长时间，例如1-2小时。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。
对于组织块样品，浸泡入3% 多聚甲醛固定液中，室温或4℃浸泡固定2到24小时。建议不超过8小时，除非组织块特别大，难以渗透。固定完成后，放入装有蒸馏水的离心管中清洗，每15-30分钟换一次水，共6-8次，建议在摇床进行，或用流水冲洗1-2小时。随后梯度脱水，进行包埋。如果暂时不包埋可放入70-75%的酒精中保存。
如将组织样品置于3% 多聚甲醛固定液中浸泡储存，请避光放置。
【注意事项】
1. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。
2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响染色。
4. 不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
5. 多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。
6. 多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果如果受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。
7. 多聚甲醛固定液固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
8. 醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。
产品规格
- 规格
- 500ml
- 货期
- 1天
应用领域
本产品适用于固定液、组织固定、细胞固定、3%多聚甲醛等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃避光保存，有效期1年；4℃避光储存
常见问题 (FAQ)
保存条件？
试剂：4℃/-20℃ 12 个月（最佳）；浑浊或析出立即丢弃。
甲醛安全？
甲醛是已知致癌物：① 戴双层手套 + 实验服；② 通风柜内操作；③ 专用废液收集（不可与酸混合）；④ 实验后立即洗手；⑤ 怀孕人员避免接触。急救：皮肤接触立即大量水冲洗；眼睛接触紧急冲洗 15 分钟 + 就医。
固定后样品如何保存？
短期（数天至数周）可直接在 4°C PBS 中浸泡；若需保存数周至数月，脱水后转入 4°C 70% 乙醇；长期保存（数年乃至数十年）则推荐石蜡包埋后室温密封储存。需注意避免固定后样品常温干燥（导致蛋白氧化降解）及反复冻融。
固定后保存为什么泡 PBS 而不是继续泡 PFA？
固定和保存是两个阶段。固定阶段样品浸泡在 PFA 中使蛋白质交联；固定完成后需用 PBS 充分漂洗去除残余 PFA，再转入 PBS 中保存。若继续浸泡在 PFA 中会导致过度固定，损伤组织结构并影响后续实验的抗原性。
与冰甲醇 / 冰丙酮固定的差异？
多聚甲醛与冰甲醇/丙酮的固定机制不同：前者通过蛋白共价交联固定，形态保留效果更好，抗原保留完整，是免疫荧光实验的标准选择；后者通过蛋白沉淀变性固定，形态保留稍差，且可能破坏部分抗原，仅在某些特殊抗原的检测中使用。
与多聚甲醛粉末自配的对比？
多聚甲醛（PFA）粉末自配：① 称量 + NaOH 加热溶解（70℃ 30 分钟）；② pH 调至 7.4；③ 过滤；④ 当天用完（甲醛会重新聚合）。本品（即用）：节省时间、批次一致、24 小时内仍可用。选择：日常 → 本品；大规模研究 → 自配。
4% 与 10% 的选择？
4%（细胞 IF / 组织 IHC 标准）：保留细胞形态最佳；10%（石蜡切片标准）：用于石蜡切片前组织固定，过夜固定常用。选择：① 细胞 IF → 4%；② 石蜡切片 → 10%；③ 流式 → 1%。
固定时间的关键？
细胞 IF：10–15 分钟（4% 室温）；组织切片：≥4 小时（厚度依赖，1 mm 厚 4 小时；10 mm 厚 24 小时）；流式样品：10 分钟（1%）足够；ChIP（蛋白-DNA 交联）：1% 仅 10 分钟（避免过度交联影响后续超声断裂）。
使用方法？
典型流程（细胞 IF）：① 弃培养基；② PBS 洗 1 次；③ 加入本固定液（3%）室温 10–15 分钟；④ PBS 洗 3 次；⑤ Triton X-100 透膜（如 0.1% 10 分钟）；⑥ 后续封闭、抗体孵育、显色。
本浓度（3%）的典型应用？
3%：温和固定，适合精细形态学（保留亚细胞结构）
本产品的核心特点？
3% 组织 / 细胞固定液（甲醛或多聚甲醛配制）。机制：甲醛与蛋白氨基（特别是赖氨酸）形成共价交联，固定细胞结构，保留组织 / 细胞形态用于后续染色。用途：① 细胞 IF / IHC 固定；② 组织切片前固定；③ 流式样品固定；④ 病理学样本制备。
