ED-8522 5×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液(DTT)

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ED-8522 5×SDS-PAGE双色蛋白上样缓冲液(DTT)
货号 (Catalog Number): ED-8522

产品描述

【保存条件】

-20℃保存,有效期12个月


【概述】

本产品为5倍浓缩的蛋白电泳专用上样缓冲液,含有高纯度SDS和强还原剂DTT,旨在彻底消除蛋白质间的结构与电荷差异,保护蛋白质免受热降解,并维持电泳过程中的 pH 环境稳定。

变性机制:

1. SDS (十二烷基硫酸钠):破坏蛋白二级、三级结构,使其带上高密度负电荷,消除电荷差异。
2. DTT (二硫苏糖醇):有效还原并断开蛋白质分子内及分子间的二硫键,实现亚单位的彻底分离。

双色追踪系统:
1. 蓝色 (溴酚蓝, Bromophenol Blue):常规电泳指示前沿,用于追踪样品运行位置。 
2. 粉红色 (派洛宁 Y, Pyronin Y):具有更快的迁移特性,特别适用于监测 Western Blot 转膜过程中蛋白质向膜(NC/PVDF)的转移情况。


使用方法

1. 溶解:室温或37°C水浴解冻并充分混匀。

2. 混合:将样品与5×上样缓冲液按4:1 的比例混合(例如:40 μL蛋白样品加入10 μL缓冲液)。若样品浓度过高,可用ddH2O预稀释。

3. 变性:混合后,95-100°C加热5–10分钟。

4. 离心:冷却至室温,以 10,000–14,000 rpm 离心 2–5 分钟,取上清液即可进行电泳。

【指示剂迁移参考】

凝胶浓度 (%)

溴酚蓝 (蓝色) 近似位置

派洛宁 Y (粉红色) 相对位置

8%

~30 kDa

迁移最快,位于前端

12%

~20 kDa

位于溴酚蓝下方

15%

~10 kDa

派洛宁Y迁移可能慢于溴酚蓝

注:在经典Tris-Glycine电泳体系(SDS-PAGE)中,两种染料的迁移位置随凝胶浓度的变化规律如上


【注意事项】

1. 溶解预警:-20°C下SDS可能会析出。使用前请务必确认溶液完全清亮。若有沉淀,可通过37°C水浴促溶并摇匀。 

2. 颜色变化:受DTT及温度影响,冻存状态下溶液可能呈现深棕色,复温溶解后会恢复正常,不影响实验结果。 

3. 上样量控制:加样量过多可能导致条带拖尾或跑样不齐;加样不足则可能导致信号微弱。

4. 示踪染料偏差:由于不同厂家生产的预制胶或配制缓冲液的离子强度差异,染料的绝对迁移位置可能存在±5 kDa的波动。

5. 操作规范:必须在通风处操作,穿实验服并戴一次性手套。

产品规格

货期
现货
规格
1ml、1ml×10管、10ml

应用领域

本产品适用于ED-8522、上样及电泳、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC(广州亿涛生物科技有限公司)提供高品质生物科研试剂,服务科研院所与生物医药企业。

存储条件

-20℃保存

品牌: ECOTOP SCIENTIFIC

常见问题

该产品如何保存?

请参照产品说明书中的保存条件。一般生物科研试剂建议在2-8℃或-20℃条件下保存,避免反复冻融。具体保存条件请以产品标签为准。

该产品的货期是多久?

ECOTOP SCIENTIFIC常规库存产品一般1-3个工作日内发货。如遇缺货情况,客服会及时与您沟通预计到货时间。

如何获取产品的技术支持?

您可以通过电话(15622108587)或在线客服联系我们的技术支持团队。我们提供产品使用指导、实验方案优化等专业技术服务。

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【保存条件】

-20℃保存,有效期12个月


【概述】

本产品为5倍浓缩的蛋白电泳专用上样缓冲液,含有高纯度SDS和强还原剂DTT,旨在彻底消除蛋白质间的结构与电荷差异,保护蛋白质免受热降解,并维持电泳过程中的 pH 环境稳定。

变性机制:

1. SDS (十二烷基硫酸钠):破坏蛋白二级、三级结构,使其带上高密度负电荷,消除电荷差异。
2. DTT (二硫苏糖醇):有效还原并断开蛋白质分子内及分子间的二硫键,实现亚单位的彻底分离。

双色追踪系统:
1. 蓝色 (溴酚蓝, Bromophenol Blue):常规电泳指示前沿,用于追踪样品运行位置。 
2. 粉红色 (派洛宁 Y, Pyronin Y):具有更快的迁移特性,特别适用于监测 Western Blot 转膜过程中蛋白质向膜(NC/PVDF)的转移情况。


使用方法

1. 溶解:室温或37°C水浴解冻并充分混匀。

2. 混合:将样品与5×上样缓冲液按4:1 的比例混合(例如:40 μL蛋白样品加入10 μL缓冲液)。若样品浓度过高,可用ddH2O预稀释。

3. 变性:混合后,95-100°C加热5–10分钟。

4. 离心:冷却至室温,以 10,000–14,000 rpm 离心 2–5 分钟,取上清液即可进行电泳。

【指示剂迁移参考】

凝胶浓度 (%)

溴酚蓝 (蓝色) 近似位置

派洛宁 Y (粉红色) 相对位置

8%

~30 kDa

迁移最快,位于前端

12%

~20 kDa

位于溴酚蓝下方

15%

~10 kDa

派洛宁Y迁移可能慢于溴酚蓝

注:在经典Tris-Glycine电泳体系(SDS-PAGE)中,两种染料的迁移位置随凝胶浓度的变化规律如上


【注意事项】

1. 溶解预警:-20°C下SDS可能会析出。使用前请务必确认溶液完全清亮。若有沉淀,可通过37°C水浴促溶并摇匀。 

2. 颜色变化:受DTT及温度影响,冻存状态下溶液可能呈现深棕色,复温溶解后会恢复正常,不影响实验结果。 

3. 上样量控制:加样量过多可能导致条带拖尾或跑样不齐;加样不足则可能导致信号微弱。

4. 示踪染料偏差:由于不同厂家生产的预制胶或配制缓冲液的离子强度差异,染料的绝对迁移位置可能存在±5 kDa的波动。

5. 操作规范:必须在通风处操作,穿实验服并戴一次性手套。

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