产品描述
【保存条件】
室温避光保存保存12个月
【概述】
油红O（Oil Red O）是一种脂溶性偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，能特异性地使组织和细胞内中性甘油三脂、脂质以及脂蛋白等染色。当组织切片置入染液时，染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中，使组织内的脂滴呈红色。用于分析细胞样品中脂质状况。本产品操作简捷，性能稳定，着色清晰。
本试剂盒规格分别有50ml和200ml的油红O染色染色液，按照每个冰冻切片染色需要使用0.2ml油红O染色工作液（工作液配制见使用建议）、6孔板每孔使用1ml油红O染色工作液来计算，可以分别检测50-250次和200-1000次。
【使用建议】
使用前：按照改良油红O染色液和油红O稀释液3:2的比例配制油红O染色工作液（以下使用均为工作液，现用现配），即每3ml改良油红O染色液加入2ml 油红O稀释液混匀作为改良油红O染色液工作液。
1. 样品处理
a. 对于细胞：
（1）缓慢吸去细胞培养液，PBS洗涤1次。
注：对于贴壁不太好的细胞，加入任何溶液时，不宜直接将溶液加到细胞上，而应沿着孔板壁缓慢加入，然后轻轻混匀，这样可以避免在加入溶液时使细胞漂浮起来。
（2）加入4％组织/细胞固定液固定液(ES-8100)或10%甲醛固定10分钟，PBS漂洗2次。
b. 对于冰冻切片：
取出预制好并保存于-20ºC的冰冻切片，放入切片架回温5-10分钟。
c. 对于骨髓涂片和血涂片：
（1）取少许样品置于载玻片上，将推玻片与载玻片保持30°角，用推玻片将骨髓推匀于玻片表面，最好制稍厚一点的涂片。将涂片在空气中自然干燥或吹干。
（2）选做：用4%多聚甲醛固定液(ES-8100)或10%甲醛溶液固定10分钟，固定后蒸馏水漂洗2次。
2. 油红O染色
a. 对于细胞：
（1）加入适量染色洗涤液覆盖细胞20秒。
注：不同细胞洗涤液使用时间可能略有偏差，可适当延长时间至最长5分钟。
（2）吸除染色洗涤液，加入适量改良油红O染色液工作液，染色10-20分钟。
注1：染液体积均匀覆盖细胞即可，以6孔板为例，可加入1ml染色工作液。
注2：可适当延长染色时间，但不要超过1小时。
（3）去除改良油红O染色液工作液，加入适量染色洗涤液，静置30秒，然后去除染色洗涤液，用PBS洗涤20秒。
注：染色洗涤液洗涤时间可根据经验延长时间至最长5分钟。
（4）选做：可用苏木素染色液(ES-8524)进行细胞核的复染。
（5）加入适量PBS，均匀覆盖细胞即可，显微镜下观察和拍照。
b. 对于冰冻切片、骨髓涂片和血涂片：
（1）加入适量染色洗涤液覆盖样品20秒。
（2）吸除染色洗涤液，取适量改良油红O染色液工作液，滴加于切片上，或直接将切片浸入染色工作液中，染色10-20分钟。
注：可适当延长染色时间，但不要超过1小时。
（3）去除改良油红O染色液工作液，将适量染色洗涤液滴加于切片上，静置30秒，然后去除染色洗涤液，浸入蒸馏水中置于摇床洗涤20秒。
（4）选做：可用苏木素染色液(ES-8524)进行细胞核的复染。
（5）染色完成后可以直接观察和拍照。也可以使用水性封片液封片，然后镜下观察和拍照。
【注意事项】
1. 本品使用Sigma原料，货号为O0625。
2. 改良油红O染色液为饱和溶液，容易有析出，不影响使用效果，也可以60ºC左右水浴加热促溶。配制工作液后若沉淀较多，可用滤纸过滤后使用。
3. 样品固定时请使用4%细胞/组织固定液(ES-8100)或10%甲醛溶液，不可用醇类或丙酮等可以溶解脂肪的固定液。
4. 油红O染色时，应避免染色液挥发，否则染色液可能会形成沉淀而产生背景。
5. 用于油红O染色的冰冻切片要适当厚一些，一般为10-15µm，切片太薄容易导致脂肪流失。
6. 油红O染色结果不能长期保存，染色完毕后应尽快观察拍照。
7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
【参考文献】
1. Andrographolide Alleviates Hepatic Inflammation in NAFLD W. Hu et al., Natural Product Research (2025)
2. Ramírez-Zacarías JL, Castro-Muñozledo F, Kuri-Harcuch W. Histochemistry. 1992. 97(6):493-7.
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 250T、1000T
存储条件
室温避光保存保存
常见问题 (FAQ)
试剂如何保存？
室温避光保存 12 个月。
染色结果保存的限制？
油红 O 染色结果不能长期保存，染色完毕后应尽快观察拍照。——油红 O 是脂溶性染料，染色后脂滴中染料会逐渐扩散到周围（即使有水性封片也无法长期固定），需当天拍照。
可用于哪些应用场景？
适用：① NAFLD（非酒精性脂肪性肝病）研究；② 脂肪细胞分化研究（3T3-L1 等）；③ 动脉粥样硬化研究（巨噬细胞泡沫化）；④ 代谢综合征研究（肥胖、糖尿病模型）；⑤ 脂质代谢通路研究；⑥ 临床病理学（脂肪肝、动脉硬化诊断）；⑦ 骨髓涂片和血涂片脂质染色。
染液析出怎么办？
改良油红 O 染色液为饱和溶液，容易有析出，不影响使用效果，也可以60℃ 左右水浴加热促溶。配制工作液后若沉淀较多，可用滤纸过滤后使用。油红 O 染色时，应避免染色液挥发，否则染色液可能会形成沉淀而产生背景。
固定液的禁忌？
样品固定时请使用 4% 细胞/组织固定液（ES-8100）或 10% 甲醛溶液，不可用醇类或丙酮等可以溶解脂肪的固定液。——这是油红 O 染色失败的最常见原因：醇类/丙酮会将待染脂肪溶解掉，染色后看不到脂滴。正确选择：4% 多聚甲醛（PFA）固定液 ES-8100。
冰冻切片流程的关键？
用于油红 O 染色的冰冻切片要适当厚一些，一般为 10–15 µm，切片太薄容易导致脂肪流失。流程：取出 -20℃ 预制冰冻切片，回温 5–10 min → 染色洗涤液覆盖 20 s → 染色工作液染色 10–20 min → 染色洗涤液 30 s → 蒸馏水洗 20 s → 可选苏木素核复染 → 可直接观察拍照，也可水性封片液封片。
完整染色流程（细胞）？
① 样品处理：缓慢吸去培养液 + PBS 洗 1 次 + 加 4% 组织/细胞固定液（ES-8100）或 10% 甲醛固定 10 min + PBS 漂洗 2 次（注：固定时不可用醇类或丙酮等可溶解脂肪的固定液）；② 染色洗涤液覆盖细胞 20 s（可适当延长至最长 5 min）；③ 吸除洗涤液，加适量染色工作液染色 10–20 min（可适当延长但不超过 1 h），6 孔板每孔加 1 mL 工作液；④ 去除染色液，加染色洗涤液静置 30 s → 弃 → PBS 洗 20 s；⑤ 可选苏木素染色液（ES-8524）做核复染；⑥ 加 PBS 覆盖，显微镜观察。
包装规格与检测次数？
本试剂盒规格分别有 50 mL 和 200 mL 的油红 O 染色液，按照每个冰冻切片染色需要使用 0.2 mL 油红 O 染色工作液、6 孔板每孔使用 1 mL 油红 O 染色工作液来计算，可以分别检测 50–250 次和 200–1000 次。
本试剂盒的核心特点？
油红 O（Oil Red O）是一种脂溶性偶氮染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，能特异性地使组织和细胞内中性甘油三酯、脂质以及脂蛋白等染色。当组织切片置入染液时，染料则离开染液而溶于组织内的脂质（如脂滴）中，使组织内的脂滴呈红色。本品使用 Sigma 原料（货号 O0625）。操作简捷，性能稳定，着色清晰。
