EK-5312 DNAex ZOL快速基因组DNA提取试剂

【保存条件】

室温保存，有效期1年

【概述】

DNAex ZOL试剂（基因组DNA分离试剂）是一种完整且现成的试剂，用于从动物、植物、酵母和细菌来源的固体和液体样本中分离基因组DNA。DNAex ZOL试剂程序基于使用一种新型的胍-洗涤剂裂解溶液，该溶液允许从细胞裂解液中选择性沉淀DNA。DNAex ZOL试剂协议速度快，允许从大量小批量或大批量样品中分离基因组DNA。

【操作方法】

 样本处理

a. 培养皿中细胞样本处理：每个10平方厘米的培养皿中加入0.75-1.0毫升的DNAex ZOL试剂。通过吹打培养皿使细胞裂解，并轻轻将裂解液吸入离心管中。（选做：裂解结束后室温下10,000×g下离心5-10分钟。离心后，将所得上清液转移到新鲜的离心管中。）

b. 细胞沉淀或悬浮液：向1-3×10⁷个细胞（沉淀或悬浮液中，体积小于0.1毫升）中加入1毫升的DNAex ZOL试剂。通过轻轻吸取液体使细胞裂解。（选做：裂解结束后室温下10,000×g下离心5-10分钟。离心后，将所得上清液转移到新鲜的离心管中。）

b. 全血样本：对于不超过100微升的全血，向血液中加入1毫升的DNAex ZOL并轻轻上下移动以裂解细胞。对于超过100微升的全血，离心沉淀细胞并用0.9%氯化钠洗涤。再次沉淀细胞，并在冷（4°C）低渗透溶液中（20mM Tris HCl（pH 8.0），10mM EDTA）中将细胞悬浮。以4,000转/分钟的速度在4°C离心10分钟。丢弃上清液加入1毫升DNAex ZOL(每1-3×10⁷个细胞加入1ml DNAex ZOL)。通过轻轻吸取液体使细胞裂解。（选做：裂解结束后室温下10,000×g下离心5-10分钟。离心后，将所得上清液转移到新鲜的离心管中。）

4. 动物等组织样本处理：每25-50mg组织样品中加入1ml DNAex ZOL进行均质化和裂解。匀浆结束后室温下10,000×g下离心10分钟。离心后，将所得上清液转移到新鲜的离心管中。此步骤从裂解物/匀浆中去除不溶性组织片段、RNA和多余的多糖。它仅用于从肝脏、肌肉和大多数含有大量细胞和/或细胞外物质的组织中分离 DNA。

II. DNA沉淀

1. 向裂解液中按每使用1ml DNAex ZOL中加入0.5ml无水乙醇，从裂解物/匀浆中沉淀 DNA。通过倒置混合样品并在室温下静置1分钟。在室温或4°C下以10,000×g离心3-5分钟将沉淀DNA收集。

2. 在室温下以10,000×g离心3-5分钟将沉淀DNA收集。

通常，在管的底部以白色沉淀的形式获得DNA。有些样品DNA在试管底部形成凝胶状膜。用乙醇洗涤后，膜变得更可见。

III. DNA清洗

1. 用0.8-1.0ml 75%乙醇洗涤DNA沉淀两次。在每次洗涤时，通过倒置试管3-6次将DNA悬浮在乙醇中。

2. 室温下以10,000×g离心3-5分钟以使DNA沉降到试管底部，并通过移液除去乙醇。

IV. DNA溶解

1. 静置5-10分钟待乙醇挥发，无需过份干燥成固体，干燥成固体的DNA沉淀不易溶解

2. 加入约50-100μl 配套DNA溶解液(DNA Elution Buffer )可确保DNA沉淀物的完全溶解。

DNAex ZOL分离的DNA在Tris缓冲液中的再溶解度较低。因此，强烈建议使用配套溶解液，DNA在其中4°C下可稳定数月，在 -20°C 下可稳定一年以上。从肝脏、肌肉和植物等组织中分离出的 DNA 制剂可能含有一些不溶性物质（主要是多糖），通过在12,000×g离心10分钟除去不溶性物质即可。

【注意事项】

1. 仅用于实验室，不适合农业/家庭/临床用途使用。

2. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. DNAex ZOL含有醇类物质，勿长时间敞开瓶盖。