ES-8528 改良Lillie-Mayer苏木素染色液

【保存条件】

室温避光储存，有效期1年。

【概述】

苏木素染色也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。

本试剂为Hematoxylin, Mayer's (Lillie's Modification)，是一种渐进式的核苏木精染色剂，具有多种组织学应用。细胞核染色强、干净、清晰，无需分化。苏木素染色后细胞核呈现蓝色。

【使用建议】

1.样品处理
a.对于石蜡切片：
二甲苯（自备）中脱蜡5-10分钟；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟；无水乙醇浸泡5分钟；90%乙醇浸泡2分钟；80%乙醇浸泡2分钟；70%乙醇浸泡2分钟。蒸馏水洗涤2分钟。
b.对于冰冻切片：
固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。
c.对于培养细胞：
固定液固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。
2.苏木素染色
对于上述处理好的样品：
a.苏木素染色液染色1-5分钟(可以根据染色结果和要求调整时间，根据组织大小和厚度进行调整)。
b.蒸馏水洗去浮色，用自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟。
c.蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。
d.选做：根据不同分化液（自备）的分化时间，分化约2-30秒，自来水冲洗10分钟。
此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
3.脱水、透明、封片观察
70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，无水乙醇10秒。二甲苯透明5分钟。换用新鲜的二甲苯，再透明5分钟。用中性树胶或其它封片剂封片。显微镜下观察，细胞核呈蓝色。

【注意事项】

1. 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。

2. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

3. 染色后的分化为选做步骤，但分化后细胞核着色更清晰。

4. 仅限于科研使用，不可用于各种食品药品或临床治疗中。

5. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。