【保存条件】
4℃保存,有效期12个月
【概述】
本产品为碳酸盐-碳酸氢盐缓冲体系(Carbonate-Bicarbonate Buffer),是酶联免疫吸附实验(ELISA)中最常用的包被液。
作用原理:在pH 9.6的碱性环境下,大多数蛋白质抗原或抗体分子带负电荷,有利于其通过疏水相互作用高效、均匀地吸附在聚苯乙烯(Polystyrene)等酶标板表面。
高兼容性:组分纯净,不含干扰蛋白结合的去污剂或杂质,能显著提高包被效率并维持蛋白的空间构象。
便捷性:10×浓缩液设计,稀释后即可获得精确pH值的即用型工作液。
【使用建议】
1. 稀释:使用前,将10×ELISA包被液用去离子水(或超纯水)按1:9的比例进行稀释,混匀即成1×工作液。例:取10 mL浓缩液加入90 mL去离子水中。
2. 抗原/抗体稀释:使用1×工作液将待包被的蛋白质(抗原或抗体)稀释至目标浓度(常用浓度范围为1–10 μg/mL,需通过预实验优化)。
3. 包被步骤:向ELISA酶标板每孔加入100 μL稀释后的蛋白溶液。密封板孔,4°C 包被过夜(约12–18 小时)或37°C恒温包被2小时。
4. 后续处理:包被结束后,弃去孔内液体,使用洗涤液(如PBST或TBST)洗涤2–3次,随后进行封闭(Blocking)步骤。
【注意事项】
1. 密封性:碳酸盐缓冲液易吸收空气中的CO2导致pH值下降。开启使用后请务必旋紧瓶盖;稀释后的1×工作液建议现配现用。
2. 安全防护:仅限实验室科研使用。操作时请穿戴实验服、一次性手套和口罩。