科研打工人福音:10分钟搞定WB封闭,准点下班不是梦!
今天也是和Western Blot相爱相杀的一天。别人做出的带,清晰锐利;你做出的带,宛如深夜里糊了一墙的水泥。
特别是封闭这一步,室温摇啊摇,牛奶味飘满整个实验室,一等就是一两个小时。要是不小心碰上夏天,牛奶还可能变质发臭,背景分分钟黑成煤炭。难道科研打工人就不配拥有准点下班的权利吗?
1 痛点:为什么你的WB总是背景高?其实,WB背景高、磷酸化蛋白出不来,多半是封闭液没选对。传统的脱脂牛奶(NFDM)虽然便宜好用,但里面含有大量的磷酸化蛋白和生物素,容易和抗体产生非特异性结合,导致背景高或掩盖目标条带。
BSA(牛血清白蛋白)虽然好点,但耗时依然不短。优化封闭步骤和封闭剂是提高WB信噪比的关键。
2 破局:5-10分钟搞定,准点下班的神器为了不让大家把青春全耗在摇床上,今天给大家安利一款科研回血神器——来自亿涛生物的 SuperBlot 无蛋白快速封闭液(ES-8710)。不需要一两小时,只需 5-10 分钟,就能达到甚至超越传统封闭液的惊艳效果!
无蛋白配方:彻底杜绝了传统蛋白封闭液对磷酸化蛋白的干扰,原位捕获更精准,背景更干净。
高信噪比:特有的促信号放大效果,让你不仅背景白,而且条带亮,还能省下不少昂贵的抗体!
随开随用:不用再费力去称量粉末、溶解、过滤,直接倒出来就能用,主打一个省心。
建议大家在做常规WB时,不妨试试这种新型封闭液,尤其是针对低丰度蛋白或磷酸化蛋白的检测。当然,使用时记得将膜洗干净后再加封闭液。科研虽然辛苦,但选对工具,每天早走一小时,去吃顿好的不香吗?
【参考资料】
1. 《SuperBlot 无蛋白快速封闭液使用说明书.pdf》
2. MacPhee DJ. Methodological considerations for improving Western blot analysis. J Pharmacol Toxicol Methods. 2010;61(2):171-7. doi: 10.1016/j.vascn.2009.12.001. PMID: 20005963.
3. Ghosh R, Gilda JE, Gomes AV. The necessity of and strategies for improving confidence in the accuracy of western blots. Expert Rev Proteomics. 2014;11(5):549-60. doi: 10.1586/14789450.2014.939635. PMID: 25059473.
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