慢病毒全流程解决方案:从质粒包装到稳转细胞株

基于 VirPack 转染试剂(EK-5403)、LentiV-X 慢病毒浓缩液(ES-7011)、LentiV-X 慢病毒保存液(ES-7008)、Polybrene 溶液(ES-8425)与嘌呤霉素溶液(ED-8566),覆盖从质粒包装、上清浓缩、病毒保存到靶细胞感染与稳转筛选的完整链条。全流程无需超速离心,普通低速冷冻离心机 1,600×g 即可实现 10–100 倍滴度提升,回收率通常稳定在 80% 以上;离心后形成米白色或半透明沉淀,操作是否成功肉眼可判读。方案提供 12天完整时间表、各培养板型体积换算、MOI 与滴度计算算例、Polybrene 与嘌呤霉素浓度摸索方法,以及常见问题排查表。

慢病毒病毒包装293T转染病毒浓缩慢病毒保存Polybrene助感染嘌呤霉素筛选稳转细胞株MOI
Step 1
病毒包装
Step 2
上清收获
Step 3
病毒浓缩
Step 4
重悬与保存
Step 5
靶细胞感染
Step 6
稳转筛选与验证

病毒包装

293T 转染前 18–24 h 铺板至汇合度 70–90%;转染前 1–2 h 换新鲜无抗生素培养基;质粒与试剂按 DNA(µg) : VirPack(µL) = 1 : 3 结合,室温 3–5 min;加 Opti-MEM 静置 10–15 min;吸出等体积旧液后滴加;4–6 h 后换液

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