【保存条件】
4℃避光保存,有效期12个月
【概述】
HEPES(4-羟乙基哌嗪乙硫磺酸)是一种非离子两性离子生物缓冲剂,其有效缓冲范围为 pH 6.8–8.2。相比于碳酸氢盐缓冲体系,HEPES 在开放式培养条件下具有更强的 pH 维持能力,能有效减缓细胞代谢产生的酸对培养环境的影响。
本产品浓度为1 M,经0.22 μm滤膜过滤除菌,可直接用于:
细胞培养:建议终浓度为 10–25 mM。
蛋白组学:配制蛋白提取缓冲液、电泳缓冲液等。
生化实验:用于酶动力学研究及各类生化反应体系。
【使用方法】
1. 稀释使用:本品为1 M母液(40× ~ 100×)。根据实验需求,用无菌去离子水或培养基稀释至工作浓度(通常为10–25 mM)。
例:在500 mL基础培养基中加入5 mL的1M HEPES母液,充分混匀即得10 mM 工作液。
2. 无菌操作:本品已除菌。在超净工作台内开启封口,避免引入微生物污染。
3. pH调节(可选):如需微调 pH,建议先稀释至工作浓度后再行测量(HEPES 具有一定的温度敏感性,建议在25°C 下测量)。
【注意事项】
1. 无菌防护:取液时请严格遵守无菌操作规范,防止细菌或霉菌污染导致液体变浑浊。
2. 局限性:虽然HEPES兼容性广,但在进行某些特定的蛋白质交联实验(如使用邻苯二甲醛)时,其伯胺结构可能会产生干扰。
3. 安全性:HEPES 具有轻微刺激性,操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。