产品描述
【保存条件】
-20℃保存，有效期24个月
【概述】
本产品是细胞培养中常用的消化试剂，适用于贴壁细胞的传代及原代组织的解离。
双重消化动力：胰酶（Trypsin）通过水解细胞间的蛋白质使细胞解离；EDTA作为螯合剂，通过结合钙、镁离子来破坏细胞间的粘附桥，两者协同作用显著提高了消化效率。
状态监控：内含酚红作为 pH 指示剂，方便监控消化液在储存过程中的酸碱度变化。
即用型：经过滤除菌，可直接用于各类细胞系或组织的消化。
【使用方法】
贴壁细胞消化（以T25培养瓶为例）：
1. 预洗：吸除旧培养基。加入无菌PBS或D-Hank's（不含钙镁）洗涤细胞1-2 次，彻底去除残留的血清（血清中的蛋白酶抑制剂会显著降低胰酶活性）。
2. 加入消化液：加入约1 mL胰酶消化液，使之完全覆盖瓶底细胞层。
3. 孵育：室温或37°C孵育。不同细胞消化时间差异较大，通常为30秒至3分钟。
4. 镜检：显微镜下观察细胞明显收缩、变圆，且细胞间隙增大。
5. 终止：立即加入含有血清的完全培养基（体积通常为胰酶的2-3倍），利用血清中的抑制剂终止消化。
6. 收集：轻轻吹打瓶壁细胞使之脱落。若需去除胰酶残留，可将细胞悬液300-500 g离心3-5 分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬。
组织块解离：
将剪碎的组织块置于消化液中，根据组织类型（如胚胎组织较易解离，纤维组织较难）调整消化时间，直至组织结构松散。
【注意事项】
1. 温度提示：胰酶在室温下活性会逐渐下降。建议分装使用，避免整瓶反复冻融或长时间放置在室温/水浴锅中。
2. 终止必要性：必须使用含血清培养基或专门的胰酶抑制剂终止反应，否则过度的蛋白水解会损伤细胞表面受体。
3. 安全防护：本品仅供科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml、500ml
应用领域
本产品适用于ES-8439、细胞消化、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃保存
常见问题 (FAQ)
与下游实验的搭配？
与冻存配套：消化收集 → 离心 → 细胞冻存液（如 ES-8721/ES-8720）重悬 → 程序降温。与转染/电穿孔搭配：消化前 12–24 小时不要消化（细胞应在 70–80% 汇合）；消化后离心一次 + Opti-MEM 洗一次去除残留血清。与流式细胞术：本品含酚红 + EDTA，不推荐直接做表面抗原流式——改用 ES-8441（无酚红）或 ES-8443（无酚红+无 EDTA）。与基因组 DNA/RNA 提取：直接进 EK 系列试剂盒兼容。与冷冻切片：消化后立即固定（4% PFA, 15 min）。
常见错误与故障排查？
错误 1：消化不彻底/细胞团聚 → ①血清未洗净（最常见）→ PBS 洗 2 次；②胰酶失活（反复冻融或长时间室温）→ 换新分装；③EDTA 螯合不足（钙镁残留）→ 用 D-Hank's 而非 PBS。错误 2：过消化（细胞死亡多） → ①时间过长 → 严格 1–3 min；②温度过高 → 改室温；③胰酶量过多 → T25 用 1 mL 即可。错误 3：弃上清吸到细胞 → 离心力不足 → 提到 500×g, 5 min。错误 4：贴壁差 → ①过消化损伤膜蛋白；②终止不彻底——FBS 比例 1:2 才够。
消化温度选择 — 室温 vs 37℃ 区别？
37℃ 消化：① 速度更快（30 s – 2 min）；② 酶活最高；③ 顽固细胞首选；④ 风险：过消化致细胞碎片多。室温（22–25℃）消化：① 速度较慢（2–5 min）；② 可控性好——更易实时监测；③ 温和，适合敏感细胞；④ 流式实验首选——细胞活性更高。选择策略：① 大批量稳定细胞系 → 37℃；② 流式 / 原代细胞 → 室温；③ 镜检发现 1/3 细胞圆缩即可加终止液——不要等全部脱壁。
胰酶的来源 + 活性单位标准？
胰酶来源：本品为猪源胰蛋白酶（Trypsin from porcine pancreas），含猪源 + 共纯化的多种酶（少量 chymotrypsin、carboxypeptidase 等）。活性标准：① 以 BAEE 单位（Benzoyl-Arginine Ethyl Ester）作为活性指标；② 0.25% w/v 浓度对应酶活约 250 USP units/mg；③ 配方含 EDTA 0.02% + NaCl 调节渗透压 + 酚红 pH 指示剂。与外源对比：相比商品化 TrypLE、Accutase 等无动物源酶，本品酶谱更广——既是优势（消化效率高）也是限制（部分酶可能造成额外水解）。
试剂保存？
-20℃ 保存，有效期 24 个月。温度提示：胰酶在室温下活性会逐渐下降。建议分装使用，避免整瓶反复冻融或长时间放置在室温/水浴锅中。终止必要性：必须使用含血清培养基终止反应。
与 ES-8750/8751 TripleSelect 的关键差异？
ES-8439（本品）传统胰酶：① 含猪源胰蛋白酶（动物源）+ 多种共纯化酶；② 必须用 FBS 终止消化；③ -20℃ 储存；④ 性价比高、通用性强。ES-8750/8751 TripleSelect：① 无动物源（GMP / 临床友好）；② 稀释即失活，无需终止剂；③ 室温稳定 12 个月。选择：① 常规研究、成本敏感 → ES-8439（本品）；② CAR-T / iPSC / 临床转化 → ES-8750/8751。
完整使用流程（贴壁细胞 T25 为例）？
① 预洗：吸除旧培养基。用无菌 PBS 或 D-Hank's（不含钙镁）洗涤细胞 1–2 次，彻底去除残留的血清（血清中的蛋白酶抑制剂会显著降低胰酶活性）；② 加入消化液：约 1 mL 胰酶消化液，覆盖瓶底细胞层；③ 孵育：室温或 37℃ 孵育，通常 30 s 至 3 min；④ 镜检：观察细胞明显收缩、变圆，且细胞间隙增大；⑤ 终止：立即加入含血清完全培养基（体积通常为胰酶的 2–3 倍），利用血清抑制剂终止消化；⑥ 收集：轻拍瓶壁使细胞脱落 + 300–500 g 离心 3–5 min + 弃上清 + 新鲜培养基重悬。
与同系列其他胰酶的关键区别？
系列产品均为 0.25% 胰酶（ES-8626 除外），区别在于是否含 EDTA 和酚红：ES-8439（本品）同时含 EDTA 和酚红，是最经典的常规细胞消化首选；ES-8441 含 EDTA 但不含酚红，适合流式或免疫荧光等对酚红敏感的实验；ES-8442 含酚红但不含 EDTA，适合 EDTA 会干扰表面抗原的流式检测场景；ES-8443 不含 EDTA 也不含酚红，适合对两者均敏感的实验；ES-8626 为 0.5% 高浓度版本，适合难以消化的顽固细胞；ES-8560 仅含 0.02% EDTA，不含胰酶，适合需要温和非酶解离的细胞。选择：① 常规细胞消化 → ES-8439（本品，最经典版本）；② 流式 / IF 实验避免酚红 → ES-8441；③ EDTA 敏感细胞（流式表面抗原）→ ES-8442/8443；④ 顽固细胞 → ES-8626（0.5% 高浓度）；⑤ 温和非酶解离 → ES-8560（仅 EDTA）。
本产品的核心特点？
本产品是细胞培养中常用的消化试剂，适用于贴壁细胞的传代及原代组织的解离。双重消化动力：胰酶（Trypsin）通过水解细胞间的蛋白质使细胞解离；EDTA 作为螯合剂，通过结合钙、镁离子来破坏细胞间的粘附桥，两者协同作用显著提高了消化效率。状态监控：内含酚红作为 pH 指示剂，方便监控消化液在储存过程中的酸碱度变化。即用型：经过滤除菌。
