产品描述
【保存条件】
-20℃保存，有效期24个月
【概述】
本产品是细胞培养中经典的解离试剂，适用于贴壁细胞的传代及原代组织的解离。
温和消化：仅含胰酶（Trypsin）成分。相比含有EDTA的版本，本品消化的机械应力更小，能有效减少对细胞表面金属离子依赖型受体及膜蛋白的损伤。
特定应用：适用于对 EDTA 敏感的细胞株，或在消化后需保留细胞表面特定抗原用于流式分析检测的实验。
即用型：经过滤除菌，可直接用于各类细胞系或组织的消化。
【使用方法】
I. 贴壁细胞消化（以T25培养瓶为例）：
1. 预洗：吸除旧培养基。加入无菌PBS或D-Hank's（不含钙镁）洗涤细胞1-2 次，彻底去除残留的血清（血清中的蛋白酶抑制剂会显著降低胰酶活性）。
2. 加入消化液：加入约1 mL胰酶消化液，使之完全覆盖瓶底细胞层。
3. 孵育：室温或37°C孵育。不同细胞消化时间差异较大，通常为30秒至3分钟。
4. 镜检：显微镜下观察细胞明显收缩、变圆，且细胞间隙增大。
5. 终止：立即加入含有血清的完全培养基（体积通常为胰酶的2-3倍），利用血清中的抑制剂终止消化。
6. 收集：轻轻吹打瓶壁细胞使之脱落。若需去除胰酶残留，可将细胞悬液300-500 g离心3-5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬。
II. 组织块解离：
将剪碎的组织块置于消化液中，根据组织类型（如胚胎组织较易解离，纤维组织较难）调整消化时间，直至组织结构松散。
【注意事项】
1. 温度提示：胰酶在室温下活性会逐渐下降。建议分装使用，避免整瓶反复冻融或长时间放置在室温/水浴锅中。
2. 终止必要性：必须使用含血清培养基或专门的胰酶抑制剂终止反应，否则过度的蛋白水解会损伤细胞表面受体。
3. 安全防护：本品仅供科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。
产品规格
- 货期
- 现货
- 规格
- 100ml
应用领域
本产品适用于ES-8443、细胞消化、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。
存储条件
-20℃保存
常见问题 (FAQ)
常见错误 + 故障排查？
Q：表面抗原信号下降？ A：① 消化过度（即使无 EDTA 也不能 >10 min）→ 严控时间；② 室温过高 → 改 25℃ 或冰浴；③ 抗体克隆敏感——查文献，比如 CD25 PC61 克隆很敏感。Q：消化效率明显低？ A：本品仅胰酶——比含 EDTA 慢 2–3 倍是正常的；① 改 37℃；② 时间延到 5–10 min；③ 不要超过 15 min——过度暴露损伤膜。Q：iPSC 应用细胞死亡多？ A：① iPSC 极敏感——用 ES-8448（0.05% 低浓度版）或 Accutase 更佳；② 或本品稀释 5 倍使用；③ 加 ROCK 抑制剂（Y-27632）保护。Q：消化后细胞团聚？ A：① 钙镁离子残留过多——本品无 EDTA 不能螯合 → 需 D-Hank's 洗一次；② 离心 + 重悬手法粗暴。
与 ES-8442（无 EDTA + 含酚红）对比？
两者本质相同——配方仅差酚红：本品（无酚红）：① 多色荧光实验首选；② 细胞培养液 pH 监控不便——需用其他指示剂或 pH 仪；③ 试剂批次品控更复杂（无视觉指示）。ES-8442（含酚红）：① 酸碱度直观可读；② 下游 FITC/GFP 实验需小心干扰——但效果不大除非高浓度；③ 通常实验室管理选 ES-8442 更方便。选择：① 多色流式 / 极致灵敏度 → 本品；② 常规无 EDTA 应用 → ES-8442 更易管理。
完整使用流程（流式 panel 优化）？
多色流式 panel 准备：① PBS+（含 Ca²⁺/Mg²⁺）洗 1 次——保护表面金属离子依赖受体；② 加 1 mL 本品；③ 室温 2–5 min（仅胰酶，比含 EDTA 慢但保留更多表位）；④ 镜检 1/3 圆缩立即终止——多色 panel 对消化敏感；⑤ 含血清培养基 2–3 倍终止；⑥ 离心 350×g, 5 min（轻柔）；⑦ FACS Buffer（PBS + 2% BSA + 1 mM Ca²⁺ + 1 mM Mg²⁺）重悬；⑧ 抗体染色 4℃ 30 min 暗孵育；⑨ PBS+ 洗 2 次；⑩ 上机检测。
本品的最纯净配方价值？
双无配方的核心价值：① 无 EDTA——金属离子依赖型受体（CD16, CD25, PTP 类等）保留完整；② 无酚红——荧光检测背景干扰最小（FITC/GFP/PE/mCherry 通道全部不受影响）。典型受益场景：① 多色流式 panel（5–10 色同时检测）——任何颜色通道不受影响；② 单细胞测序（10× Genomics）——细胞表面 marker 用于细胞类型注释；③ 报告基因 + 表面抗原联合分析；④ CD16+ NK 细胞功能实验——CD16 是金属离子依赖。
试剂保存？
-20℃ 保存，有效期 24 个月。
典型应用场景？
适用：① 流式细胞表面抗原检测（CD3/CD4/CD8/CD19 等需保持膜完整的 panel）；② CAR-T 制备前 T 细胞分离；③ 荧光报告基因实验消化；④ 金属离子依赖受体研究；⑤ 类器官单细胞解离；⑥ iPSC 培养消化（部分需要温和条件）。
使用方法？
① 预洗：PBS / D-Hank's 洗涤 1–2 次去血清；② 加 1 mL 消化液覆盖细胞；③ 室温或 37℃ 孵育 30 s – 3 min；④ 镜检细胞变圆 + 间隙增大；⑤ 加含血清培养基 2–3 倍终止；⑥ 离心收集。
ES-8443 与同系列胰酶产品如何选择？
四款产品均为 0.25% 胰酶，区别仅在于 EDTA 和酚红的组合：ES-8439 两者均含，适合常规细胞传代；ES-8441 含 EDTA 不含酚红，适合需要避免酚红干扰的流式实验；ES-8442 含酚红不含 EDTA，适合需要保留表面抗原但对酚红不敏感的场景；ES-8443（本品）不含 EDTA 也不含酚红，配方最纯净，是流式细胞术及表面抗原检测的最优选择。
本产品的核心特点？
双无配方：不含 EDTA + 不含酚红——胰酶系列中对下游实验干扰最小的版本。应用场景：① 流式细胞术 + 表面抗原研究（无 EDTA 保留金属离子依赖受体）；② 酚红敏感的荧光检测（GFP/mCherry/流式 FITC 等）；③ EMSA / 蛋白构象研究；④ 类器官 / iPSC 等敏感细胞的温和消化。
