4％组织细胞固定液 - ES-8100 | Ecotopbio

ES-8100 4％组织细胞固定液

货号 (Catalog Number)： ES-8100

产品描述

【保存条件】

4℃避光储存，有效期12个月

【概述】

本产品为4%多聚甲醛 (PFA) 的磷酸盐 (PBS) 缓冲溶液，是免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）及流式分析（FACS）中最常用的生物样本固定液。

保护机制：通过诱导蛋白质分子间产生共价交联，形成网格结构，从而终止酶促反应，防止组织自溶，完美保持细胞形态与核酸完整性。

抗原原位保存：特别适用于免疫组化检测，能有效防止抗原失活或弥散，提供优良的定位效果。

应用广泛：适用于皮肤、肌肉、内脏及各类培养细胞的固定，但主要作用于蛋白质，不适用于尿酸和糖类的固定。

【操作建议：样本固定指南】

【注意事项】

1. 固定时间把控：PFA虽然作用温和，但长期交联会导致组织硬化变脆，增加切片碎裂风险。建议组织块固定时间不要超过24小时。

2. 抗原修复必要性：醛基与蛋白质氨基形成的交联网格可能会掩盖抗原决定簇，导致假阴性。在进行免疫组化检测前，通常需要进行抗原修复（如热修复或酶修复）以充分暴露抗原。

3. 安全防护：多聚甲醛具有刺激性与毒性。操作须在通风橱中进行，佩戴口罩、手套并穿着实验服。严禁用于食品或临床医疗。

本产品适用于ES-8100、细胞及组织固定、生物科研试剂、ECOTOP SCIENTIFIC等研究领域。ECOTOP SCIENTIFIC（广州亿涛生物科技有限公司）提供高品质生物科研试剂，服务科研院所与生物医药企业。

特别适用于免疫组化检测，能有效防止抗原失活或弥散，提供优良的定位效果

品牌： ECOTOP SCIENTIFIC

保存条件？

试剂：4℃/-20℃ 12 个月（最佳）；浑浊或析出立即丢弃。

甲醛安全？

甲醛是已知致癌物：① 戴双层手套 + 实验服；② 通风柜内操作；③ 专用废液收集（不可与酸混合）；④ 实验后立即洗手；⑤ 怀孕人员避免接触。急救：皮肤接触立即大量水冲洗；眼睛接触紧急冲洗 15 分钟 + 就医。

固定后保存为什么泡 PBS 而不是继续泡 PFA？

固定和保存是两个阶段。固定阶段样品浸泡在 PFA 中使蛋白质交联；固定完成后需用 PBS 充分漂洗去除残余 PFA，再转入 PBS 中保存。若继续浸泡在 PFA 中会导致过度固定，损伤组织结构并影响后续实验的抗原性。

固定后样品如何保存？

短期（数天至数周）可直接在 4°C PBS 中浸泡；若需保存数周至数月，脱水后转入 4°C 70% 乙醇；长期保存（数年乃至数十年）则推荐石蜡包埋后室温密封储存。需注意避免固定后样品常温干燥（导致蛋白氧化降解）及反复冻融。

与冰甲醇 / 冰丙酮固定的差异？

多聚甲醛与冰甲醇/丙酮的固定机制不同：前者通过蛋白共价交联固定，形态保留效果更好，抗原保留完整，是免疫荧光实验的标准选择；后者通过蛋白沉淀变性固定，形态保留稍差，且可能破坏部分抗原，仅在某些特殊抗原的检测中使用。

与多聚甲醛粉末自配的对比？

多聚甲醛（PFA）粉末自配：① 称量 + NaOH 加热溶解（70℃ 30 分钟）；② pH 调至 7.4；③ 过滤；④ 当天用完（甲醛会重新聚合）。本品（即用）：节省时间、批次一致、24 小时内仍可用。选择：日常 → 本品；大规模研究 → 自配。

4% 与 10% 的选择？

4%（细胞 IF / 组织 IHC 标准）：保留细胞形态最佳；10%（石蜡切片标准）：用于石蜡切片前组织固定，过夜固定常用。选择：① 细胞 IF → 4%；② 石蜡切片 → 10%；③ 流式 → 1%。

固定时间的关键？

细胞 IF：10–15 分钟（4% 室温）；组织切片：≥4 小时（厚度依赖，1 mm 厚 4 小时；10 mm 厚 24 小时）；流式样品：10 分钟（1%）足够；ChIP（蛋白-DNA 交联）：1% 仅 10 分钟（避免过度交联影响后续超声断裂）。

使用方法？

典型流程（细胞 IF）：① 弃培养基；② PBS 洗 1 次；③ 加入本固定液（4%）室温 10–15 分钟；④ PBS 洗 3 次；⑤ Triton X-100 透膜（如 0.1% 10 分钟）；⑥ 后续封闭、抗体孵育、显色。

本浓度（4%）的典型应用？

4%：最常用浓度（细胞 IF / 组织 IHC 标准）

本产品的核心特点？

4% 组织 / 细胞固定液（甲醛或多聚甲醛配制）。机制：甲醛与蛋白氨基（特别是赖氨酸）形成共价交联，固定细胞结构，保留组织 / 细胞形态用于后续染色。用途：① 细胞 IF / IHC 固定；② 组织切片前固定；③ 流式样品固定；④ 病理学样本制备。