Question 1

保存条件？

Accepted Answer

试剂：4℃/-20℃ 12 个月（最佳）；浑浊或析出立即丢弃。

Question 2

甲醛安全？

Accepted Answer

甲醛是已知致癌物：① 戴双层手套 + 实验服；② 通风柜内操作；③ 专用废液收集（不可与酸混合）；④ 实验后立即洗手；⑤ 怀孕人员避免接触。急救：皮肤接触立即大量水冲洗；眼睛接触紧急冲洗 15 分钟 + 就医。

Question 3

固定后保存为什么泡 PBS 而不是继续泡 PFA？

Accepted Answer

固定和保存是两个阶段。固定阶段样品浸泡在 PFA 中使蛋白质交联；固定完成后需用 PBS 充分漂洗去除残余 PFA，再转入 PBS 中保存。若继续浸泡在 PFA 中会导致过度固定，损伤组织结构并影响后续实验的抗原性。

Question 4

固定后样品如何保存？

Accepted Answer

短期（数天至数周）可直接在 4°C PBS 中浸泡；若需保存数周至数月，脱水后转入 4°C 70% 乙醇；长期保存（数年乃至数十年）则推荐石蜡包埋后室温密封储存。需注意避免固定后样品常温干燥（导致蛋白氧化降解）及反复冻融。

Question 5

与冰甲醇 / 冰丙酮固定的差异？

Accepted Answer

多聚甲醛与冰甲醇/丙酮的固定机制不同：前者通过蛋白共价交联固定，形态保留效果更好，抗原保留完整，是免疫荧光实验的标准选择；后者通过蛋白沉淀变性固定，形态保留稍差，且可能破坏部分抗原，仅在某些特殊抗原的检测中使用。

Question 6

与多聚甲醛粉末自配的对比？

Accepted Answer

多聚甲醛（PFA）粉末自配：① 称量 + NaOH 加热溶解（70℃ 30 分钟）；② pH 调至 7.4；③ 过滤；④ 当天用完（甲醛会重新聚合）。本品（即用）：节省时间、批次一致、24 小时内仍可用。选择：日常 → 本品；大规模研究 → 自配。

Question 7

4% 与 10% 的选择？

Accepted Answer

4%（细胞 IF / 组织 IHC 标准）：保留细胞形态最佳；10%（石蜡切片标准）：用于石蜡切片前组织固定，过夜固定常用。选择：① 细胞 IF → 4%；② 石蜡切片 → 10%；③ 流式 → 1%。

Question 8

固定时间的关键？

Accepted Answer

细胞 IF：10–15 分钟（4% 室温）；组织切片：≥4 小时（厚度依赖，1 mm 厚 4 小时；10 mm 厚 24 小时）；流式样品：10 分钟（1%）足够；ChIP（蛋白-DNA 交联）：1% 仅 10 分钟（避免过度交联影响后续超声断裂）。

Question 9

使用方法？

Accepted Answer

典型流程（细胞 IF）：① 弃培养基；② PBS 洗 1 次；③ 加入本固定液（4%）室温 10–15 分钟；④ PBS 洗 3 次；⑤ Triton X-100 透膜（如 0.1% 10 分钟）；⑥ 后续封闭、抗体孵育、显色。

Question 10

本浓度（4%）的典型应用？

Accepted Answer

4%：最常用浓度（细胞 IF / 组织 IHC 标准）

Question 11

本产品的核心特点？

Accepted Answer

4% 组织 / 细胞固定液（甲醛或多聚甲醛配制）。机制：甲醛与蛋白氨基（特别是赖氨酸）形成共价交联，固定细胞结构，保留组织 / 细胞形态用于后续染色。用途：① 细胞 IF / IHC 固定；② 组织切片前固定；③ 流式样品固定；④ 病理学样本制备。

ES-8100 4％组织细胞固定液