ES-8448 0.05%胰酶细胞消化液(含EDTA)

【保存条件】

-20℃保存，有效期2年

【概述】

本产品是经过优化的低浓度细胞消化试剂，旨在提供比标准 0.25% 胰酶更温和的解离环境。

温和解离：较低的酶浓度可显著降低对细胞表面受体和膜蛋白的过度水解，极大程度保护细胞活性，减少消化后的贴壁延迟。

适用对象：特别适用于高度敏感细胞（如原代细胞、胚胎干细胞）或极易消化脱落的细胞系（如 HEK293T, HeLa 等）。

协同效应：EDTA 的加入通过螯合钙、镁离子协助解离，在低浓度酶量下依然能维持高效的单细胞化效果。

品质保障：含有酚红作为pH指示剂，经过0.22 μm滤膜过滤除菌。

【使用方法】

贴壁细胞消化（以T25培养瓶为例）：

1. 预洗：吸除旧培养基。加入无菌PBS或D-Hank's（不含钙镁）洗涤细胞1-2 次，彻底去除残留的血清（血清中的蛋白酶抑制剂会显著降低胰酶活性）。

2. 加入消化液：加入约1 mL胰酶消化液，使之完全覆盖瓶底细胞层。

3. 孵育：室温或37°C孵育。不同细胞消化时间差异较大，通常为30秒至3分钟。

4. 镜检：显微镜下观察细胞明显收缩、变圆，且细胞间隙增大。

5. 终止：立即加入含有血清的完全培养基（体积通常为胰酶的2-3倍），利用血清中的抑制剂终止消化。

6. 收集：轻轻吹打瓶壁细胞使之脱落。若需去除胰酶残留，可将细胞悬液300-500 g离心3-5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬。

【注意事项】

1. 温度提示：胰酶在室温下活性会逐渐下降。建议分装使用，避免整瓶反复冻融或长时间放置在室温/水浴锅中。

2. 终止必要性：必须使用含血清培养基或专门的胰酶抑制剂终止反应，否则过度的蛋白水解会损伤细胞表面受体。

3. 安全防护：本品仅供科研使用。操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。